基因調控網絡：解碼生命的交響樂

2025-02-08 摘要：基因調控網絡（GRNs）是控制基因表達的復雜系統，決定了細胞的身份、功能和命運。理解GRNs對于揭示發育、疾病和進化的奧秘至關重要。本文將深入探討GRNs的組成、動態特性、分析方法及其在生物學中的應用。關鍵詞：基因調控網絡，基因表達，轉錄因子，順式調控元件，系統生物學1.引言生命體由數以萬計的基因組成，但并非所有基因在所有時間都處于活躍狀態。基因調控網絡（GRNs）就像指揮家，精確地控制著基因的表達時間和水平，從而協調細胞的活動，構建出復雜的生命體。2.GRNs的組成G...

為何酶不能保存在-80°C冰箱？

2025-02-07 生物實驗室的寶子們，平時做PCR實驗，一定離不開各種酶的使用，而酶一般都保存在-20°C的冰箱中。實驗室除了-20℃冰箱，肯定都還有-80℃的冰箱，那為什么我們要選擇-20℃，而不選擇溫度更低的-80°C的呢?大家有思考過這個問題嗎?酶在-80°C下保存是為了維持其活性和穩定性，但并非所有酶都需要如此低溫保存。以下是專業解讀：1.酶的特性溫度敏感性：酶是蛋白質，高溫易導致變性，低溫則能減緩降解和變性速度。長期保存需求：-80°C能有效抑制酶活性中心的破壞和蛋白水解酶的降解。2...

懸浮細胞的轉染

2025-02-06 一、懸浮細胞都有什么？懸浮生長的細胞是指在體外培養時不依賴于支持物表面，而是在培養液中以懸浮狀態生長的細胞。這類細胞通常來源于血液、淋巴組織，例如某些腫瘤細胞和轉化細胞。懸浮細胞的特點是細胞呈圓形，一般不貼于支持物上，易于大量繁殖。在體外培養的細胞類型中，懸浮細胞可以呈單個細胞或細小的細胞團生長。以下是一些常見的懸浮生長細胞類型：小鼠腹水瘤S180小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0人造血系腫瘤細胞U937、HL60、K562人原髓細胞白血病細胞HL-60小鼠白血病細胞WEHI-3人...

慢病毒轉染貼壁細胞全流程詳解

2025-02-06 慢病毒轉染貼壁細胞全流程詳解一、細胞種板將細胞種在12孔板中，每孔1.5×10^5個細胞。每孔加入1mlwan全培養基。二、病毒感染1.待細胞生長至30%～50%時開始轉染。2.將病毒從冰箱取出，放在冰上融化。3.打開生物安全柜，關閉風機，戴好帽子和口罩。4.棄去培養基，用PBS洗三次。5.每孔加入500ulwan全培養基。6.根據公式計算每孔所需病毒量：每孔病毒量（μL）=MOIx細胞數/病毒滴度（TU/mL）×1000。7.4小時后，再向孔板中加入500ulwan全培養基...

小分子蛋白的WB該如何？

2025-01-23 WB（WesternBlot）是一種常用的生物化學實驗技術，用于檢測和分析蛋白樣品中特定蛋白質的存在和表達水平。它通過將樣品中的蛋白質分離并轉移到膜上，然后使用特定的抗體識別目標蛋白，并通過化學或免疫檢測方法來可視化這些蛋白質。WesternBlot技術通常包括樣品制備、SDS-PAGE電泳分離、蛋白轉印、封閉和抗體檢測、曝光顯影等步驟。目前WB被廣泛應用于生物醫學研究中，用于研究蛋白質表達、翻譯后修飾以及蛋白質相互作用等。圖1.WB流程圖在日常實驗過程中，小分子蛋白是非常常...

明明凍存的時候細胞長得好好的，怎么一復蘇就完啦？

2025-01-21 不知道大家是否會遇到細胞凍存的時候狀態非常不錯，結果等到需要用到該細胞的時候怎么也復蘇不起來的情況啊？或許可能是凍存細胞的時候出現了什么差錯？一.細胞凍存的原則：慢凍，細胞在冷凍過程中，如果降溫過快，會形成大的冰晶，這些冰晶會破壞細胞結構，導致細胞死亡。詳細版本見《細胞凍存的原理是什么？》二.凍存液的配置：常用配置比例：培養基:血清:DMSO=7:2:1適用于大多數細胞系，能夠保證細胞在凍存過程中有較高的存活率。血清:DMSO=9:1適用范圍：適用于需要長時間保存或者具有特別...

CCK8實驗注意事項

2025-01-20 CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的進行細胞增殖和毒性分析。基本原理：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓liu酸2甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增...

CCK8實驗一文就懂！

2025-01-20 前面我們在文章《為什么CCK8鏡下趨勢是對的，測出來的OD值卻不對？？》中cue到過CCK8實驗，那么CCK8具體到底是什么呢，讓我們今天一起詳細了解下吧~一、CCK-8實驗的基本定義與原理CCK-8實驗是一種廣泛應用于細胞生物學研究的細胞增殖和毒性檢測方法。其基本原理在于利用細胞內的代謝酶將無色的CCK-8試劑（CellCountingKit-8）中的WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽）還原為具有高...