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更新時間:2026-01-20
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條件重編程培養基(Conditionally Reprogrammed Cell Medium, CRC Medium)是近年來細胞生物學和腫瘤學研究中的一項革命性技術。
這項技術能讓正常上皮細胞和腫瘤細胞在體外快速、近乎無限地增殖,而不會發生惡性轉化或改變其原有的基因組特性。
一、 條件重編程細胞培養核心原理:一個“時間暫停"的開關
傳統原代細胞培養面臨兩大難題:1)細胞壽命有限,傳幾次代就衰老;2)很多細胞(如正常上皮細胞)在體外難以存活和擴增。
CR技術巧妙地解決了這個問題。其核心原理在于,通過兩種關鍵成分的協同作用,暫時性地、可逆地“關閉"了細胞衰老和分化的程序,同時強烈激活了細胞的干性/再生潛能,使其進入一種高速自我更新的“祖細胞"狀態。一旦移除這些成分,細胞又能恢復正常的生長、分化和衰老進程。
簡單比喻:它不是讓細胞“yong久變身",而是給細胞打了一劑 “暫停分化、全力增殖"的臨時強心針。

二、 條件重編程細胞培養培養基的關鍵成分
一個完整的CR培養體系包含兩大部分:
1. 飼養層細胞:通常是經過輻照處理的小鼠3T3-J2成纖維細胞。它們不分裂,但能分泌關鍵的細胞外基質和生長因子,為上皮細胞提供zui接近體內的物理和生化微環境,是CR成功的物理基礎。
2. 條件重編程培養基:在基礎培養基(如DMEM/F12)中添加以下兩類核心成分:
Rho激酶抑制劑:zui常用且關鍵的是 Y-27632。它的作用是:
抑制ROCK信號通路,強烈抑制細胞凋亡,顯著提高細胞貼壁和存活率。
促進細胞去分化,增強其增殖和克隆形成能力。
飼養層細胞條件培養基:收集培養過3T3-J2細胞的培養基上清,含有其分泌的多種生長因子(如EGF、FGF等),是激活和支持細胞增殖的生化基礎。
典型配方 = 基礎培養基 + 10% 胎牛血清 + Rho激酶抑制劑 + 飼養層細胞條件培養基。
三、 條件重編程細胞培養突出優勢與應用場景
優勢 | 具體體現 | 應用領域 |
快速擴增 | 可在2-4周內將少量活檢組織擴增至百萬倍,建立活細胞庫。 | 患者來源腫瘤模型:用于藥敏測試、個體化醫療。 |
保持原代特性 | 維持了供體的基因型、表型和腫瘤異質性,比傳統細胞系更具臨床相關性。 | 癌癥研究:研究腫瘤生物學、耐藥機制。 |
培養“難養"細胞 | 成功培養了從前難以體外培養的正常宮頸、乳腺、前列腺、肺、肝等上皮細胞。 | 正常組織研究:疾病建模、毒性測試、再生醫學。 |
可逆性 | 撤掉Y-27632和飼養層后,細胞能恢復分化和衰老,可用于研究分化過程。 | 發育與分化研究。 |
無基因改造 | 是化學誘導的、非遺傳學的方法,避免了轉基因帶來的不確定性。 | 基礎研究和臨床前模型。 |
四、 條件重編程細胞培養主要供應商
您無需自己配制,多家公司提供成熟的CR培養基試劑盒或核心組分:
Thermo Fisher Scientific:提供 “Gibco™ 條件重編程試劑盒",這是zui有名、引用zui廣的商業化產品,包含優化好的培養基、添加劑和詳細的培養方案。
STEMCELL Technologies:提供 “IntestiCult™類器官生長培養基" 等相關產品,其原理與CR技術有共通之處,常用于腸道等類器官培養。
Sigma-Aldrich / Merck:提供核心小分子抑制劑 Y-27632。
國產品牌:如北京義翹神州等生物科技公司也提供相關的細胞培養添加劑。
五、 重要注意事項
1. 污染風險:使用小鼠飼養層細胞,存在引入鼠源病原體(如支原體)或細胞交叉污染的風險。需嚴格進行物種鑒定和病原檢測。
2. 成本較高:商業試劑盒和飼養層細胞的維護成本相對傳統培養要高。
3. 技術門檻:需要同時維持飼養層細胞和目的細胞的培養,操作步驟比常規培養更繁瑣。
4. 并非wan能:對某些類型的細胞(如一些間葉來源的腫瘤)效果可能不佳。
總結
條件重編程培養基及其技術,是連接臨床樣本與體外研究的強力橋梁。它使得從患者身上獲取的微量組織(如穿刺活檢)能夠快速擴增,用于實時藥敏測試或建立生物樣本庫,極大地推動了個體化精準醫療和轉化醫學的發展。對于從事腫瘤學、上皮細胞生物學和再生醫學的研究者而言,這是一項強大工具。
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