CST抗體說明書

一、產品概述

CST抗體以高特異性、靈敏度和穩定性著稱，廣泛應用于蛋白質功能研究、信號通路分析及疾病機制探索。其核心產品線包括XP®系列兔單克隆抗體（采用XMT®技術開發）和經嚴格驗證的多克隆抗體，覆蓋腫瘤標志物、磷酸化修飾蛋白、細胞周期調控因子等靶點。

二、產品組成與規格

1. 抗體形式

• 液體抗體：含50%甘油緩沖液（避免凍融），直接使用無需復溶。

• 凍干抗體：需用推薦緩沖液（如無菌水或含BSA的PBS）復溶。

2. 包裝規格

• 常見規格：20μL、100μL、200μL、1mL。

• 配套試劑：推薦使用CST推薦的封閉液、二抗及顯色試劑（如SignalStain®系列）。

三、儲存條件與有效期

1. 儲存溫度

• 未開封抗體：-20℃保存（含甘油，保持液態）；偶聯抗體（如HRP標記）需4℃保存。

• 開封后抗體：建議分裝后-20℃保存，避免反復凍融（注：CST不建議分裝，若必須分裝需確保無菌操作）。

2. 有效期

• 單組分抗體：以管身“Ref:"后的灌裝日期為起始，通常為2年。

• 試劑盒：以條形碼標簽日期為準，凍干細胞因子產品需在購買后12個月內使用。

四、使用方法

1. 實驗前準備

• 查閱說明書：確認抗體的應用范圍（如WB、IHC、IF）、推薦稀釋比例及種屬反應性（如人、小鼠、大鼠）。

• 樣本處理：

• 細胞裂解液：推薦使用CST專用裂解緩沖液（如RIPA Buffer），加入蛋白酶/磷酸酶抑制劑。

• 組織樣本：福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）樣本需按說明書進行抗原修復。

2. 推薦操作流程

• Western Blot（WB）

1. 上樣量：20-30μg總蛋白，使用12% SDS-PAGE膠分離。

2. 轉膜：濕轉法，推薦0.2μm硝酸纖維素膜（NC膜）。

3. 封閉：5%脫脂牛奶（貨號#9999）室溫封閉1小時。

4. 一抗孵育：4℃過夜（磷酸化抗體需延長反應時間）。

5. 二抗：抗兔/鼠HRP標記二抗（貨號#7074/#7076），室溫孵育1小時。

• 免疫組化（IHC）

1. 抗原修復：推薦檸檬酸緩沖液（pH6.0）高壓修復。

2. 阻斷：3% H?O?處理10分鐘，5% BSA封閉。

3. 顯色：DAB或SignalStain®顯色試劑。

五、注意事項

1. 購買渠道

• CST代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供CST抗體、試劑盒等，確保正品及售后支持。

2. 抗體分裝禁忌

• 分裝可能導致濃度不均、污染或活性損失，CST不承擔分裝后質量問題。

3. 實驗優化建議

• 磷酸化抗體：需嚴格驗證樣本刺激條件（如EGF處理15分鐘激活Akt）。

• 多色流式：搭配CompBeads微球調節熒光補償，避免通道干擾。

4. 常見問題排查

• 無信號：檢查樣本中靶蛋白表達水平（參考UniProt或BioGPS數據庫），確認抗體稀釋比例及孵育時間。

• 高背景：縮短封閉時間，更換封閉液（如BSA替代脫脂牛奶）。

附錄：推薦配套試劑

注：更多產品信息請聯系天津益元利康生物科技有限公司。