南京建成丙氨酸氨基轉移酶測試盒微板法(C009-2-1)現貨供應

更新時間：2024-04-11

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產品名稱：南京建成丙氨酸氨基轉移酶測試盒微板法(C009-2-1)現貨供應

產品貨號：C009-2-1

產品品牌：南京建成

產品規格：96T

操作過程：

1、樣本前處理:

①、血清（漿）及其它液體樣本待測：直接測定。

②、動物組織樣本：準確稱取組織重量，按重量（g）：體積 (mL)=1:9 的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2500 轉/分，離心 10 分鐘，取上清液待測。

③、培養細胞樣本前處理：將收集好的細胞用等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水）清洗 1～ 2 次；1000 轉/分,離心 10 分鐘,棄上清,留細胞沉淀，加入勻漿介質（推薦加入 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水），冰水浴條件下超聲破碎或手動勻漿，制備好的勻漿液不離心，待測。

2、操作表：

	測定孔	對照孔
基質液（μL）37℃已預溫	20	20
待測樣本（μL）	5
37℃反應 30 分鐘 (測定孔每吸取一個樣本，將吸嘴伸入孔板底部基質液中，反復吸打混勻,但注意不要吸入氣泡)
2，4—*肼液（μL）	20	20
待測樣本（μL）		5
37℃反應 20 分鐘 (對照孔每吸取一個樣本，將吸嘴伸入孔板底部液體中，反復吸打混勻, 但注意不要吸入氣泡)
0.4mol/L 氫氧化鈉液（μL）	200	200
輕輕水平搖動 96 孔板混勻，室溫放置 15 分鐘，波長 510nm，酶標儀測定各孔 OD 值，以絕對 OD 值(測定孔 OD 值減去對照孔 OD 值），查標準曲線，求得相應的 ALT/GPT 活力單位。

注意事項：

1、比色法中常用的有賴氏（Reitman-Frankel）法及金氏（King）法。賴氏法標準曲線所定單位數，是用實驗方法和卡門氏分光光度法（速率法）作對比測定求得的。以卡門氏單位報告結果，比較準確。卡門氏單位定義：1mL 液體，反應液總容量3mL，波長340nm，1cm 光徑，25℃，1min 內所生成的丙酮酸，使NADH氧化成 NAD+而引起吸光度每下降0.001 為一個單位（1卡門氏單位=0.482 U/L，25℃）。

2、一般血清標本內源性酮酸很少，血清對照孔吸光度值接近試劑空白孔（以雙蒸水代替血清，其他和對照孔同樣操作）。所以，成批標本測定時，一般不需要每一標本都作本身血清對照孔，以試劑空白孔代替即可，但對脂血、黃疸或溶血血清，每份標本應作對照孔。

3、酶活力超過 150 卡門氏單位時，用生理鹽水稀釋血清后重測。

4、應將一般血清的對照孔（或稱標本空白孔）的吸光度作為日常質控的指標之一；如相差大，可考慮α-酮戊二酸濃度、DNPH濃度及儀器等原因引起。

5、血清中 ALT 在室溫（25℃）可保存2 天，在0～4℃可保存一周，在-25℃可保存 1 個月。

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貨號	產品名稱	規格
C009-2-1	Alanine aminotransferase Assay Kit	96T

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