Wako之BAMBANKER® 無(wú)血清細(xì)胞凍存液(302-14681)凍存細(xì)胞的方法

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。

BAMBANKER是一種含DMSO的無(wú)血清細(xì)胞凍存液，無(wú)不明動(dòng)物源成分，高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為實(shí)驗(yàn)效果帶來(lái)保證。不需要進(jìn)行程序降溫，可在-80℃長(zhǎng)期保存細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）。那么你知道BAMBANKER® 無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞的方法嗎？讓我們一來(lái)看看吧！

一、凍存操作步驟

①?gòu)暮銣叵渲腥〕雠囵B(yǎng)中處于對(duì)數(shù)增殖期的細(xì)胞。

凍存對(duì)數(shù)增殖期的細(xì)胞，是可以確保細(xì)胞良好生存率中最重要的一點(diǎn)。

②使用部分細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量。

③將培養(yǎng)液移至離心管中，在規(guī)定條件下進(jìn)行離心。

④去除上清液后，將雜質(zhì)顆粒通過(guò)旋渦操作進(jìn)行懸浮。

⑤每個(gè)凍存容器中細(xì)胞數(shù)要保持規(guī)定濃度，然后再添加凍存液。（每 1mL 凍存液可容納 5×10⁵-1×10⁷ 個(gè)細(xì)胞）

之后的操作步驟盡可能快速完成。另外，凍存液從冷藏柜取出后，盡快進(jìn)行保存處理

⑥無(wú)需預(yù)冷細(xì)胞懸浮液，直接置于-80℃下保存。

若儲(chǔ)存在冷凍處理容器 bicell中，效果更佳。

⑦保存液氮時(shí)，先在-80℃保存 12 小時(shí)（超過(guò)一晚），待狀態(tài)穩(wěn)定后在移至液氮中保存。

轉(zhuǎn)移細(xì)胞時(shí)請(qǐng)盡快完成操作。

二、解凍操作步驟

①在 37℃恒溫箱（或者水浴鍋）等設(shè)備中解凍細(xì)胞，確認(rèn)細(xì)胞液wan全融解。

此操作需迅速進(jìn)行。因?yàn)榧?xì)胞在解凍過(guò)程過(guò)極易受到損壞。

②將細(xì)胞液注入到 10mL 的清洗液（培養(yǎng)液）中，混合wan全后在規(guī)定條件下進(jìn)行離心

（比如：300～400×ｇ；半徑 21cm 轉(zhuǎn)子 1200rpm）

③去除上清液后，將雜質(zhì)顆粒通過(guò)旋渦操作進(jìn)行懸浮。

④加入培養(yǎng)液后混合wan全后，將其中一部分細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量。

⑤將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器中，恒溫箱內(nèi)靜置培養(yǎng)。

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